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          Bradford蛋白濃度測定試劑盒使用說明

          發布日期: 2011-06-08
          瀏覽人氣: 7062

          保存條件: G250染色液4℃保存,蛋白標準-20℃保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內有效。

          Bradford蛋白濃度測定試劑盒特點:

          1.Bradford蛋白濃度測定試劑盒是根據目前世界上常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford 法研制而成,實現了蛋白濃度測定的快速,穩定和高靈敏度。
          2.檢測速度極快,10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成。 
          3. 靈敏度高,檢測濃度下限達到25微克/毫升,小檢測蛋白量達到0.5微克,待測樣品體積為1-20微升。  在50-1000微克/毫升濃度范圍內有較好的線性關系。
          4.不象一些其它蛋白濃度測定方法(包括Lowry法),Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.1%,Triton X-100 低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用碧云天的BCA蛋白濃度測定試劑盒。
          5.Bradford蛋白濃度測定試劑盒對樣品中各種物質詳細的兼容性表,參見Bradford蛋白濃度測定兼容性表。
          Ø 每個試劑盒可以檢測1000個樣品。

          Bradford蛋白濃度測定試劑盒使用說明:
          1. *溶解蛋白標準品,取10ml稀釋100ml ,使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。
          但是為了簡便起見,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標準品。
          2. 將標準品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升分別加到96孔板中,加標準品稀釋液補足到20微升。
          3. 加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中,加標準品稀釋液到20微升。
          4. 各孔加入200微升G250染色液,室溫放置3-5分鐘。
          5. 用酶標儀測定A595,或560-610nm之間的其它波長的吸光度。
          6. 根據標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

          Bradford蛋白濃度測定試劑盒注意事項: 
          1. G250染色液使用前請顛倒3-5次,混勻。
          2.蛋白標準請在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。
          3.由于 Bradford方法本身的局限性,得到的標準曲線只是在一定范圍內可以近似看成直線,要得到更為的蛋白濃度結果,可以參照實際測得的標準曲線大致計算出較為的蛋白濃度。
          4.將G250染色液回復到室溫再使用,有利于提高檢測的靈敏度。
          5.需可檢測560-610nm之間波長的酶標儀一臺,佳檢測波長為595nm。并需96孔板。如果沒有酶標儀,也可以使用普通的分光光度計測定,但是測定蛋白濃度時,需根據測定吸光度的杯子的體積,按比例調整G250 染色液和樣品的體積。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少。
          6.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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