抗體洗脫液的原理介紹

抗體洗脫液的原理介紹

    日益增長的抗體使用，研究目的蛋白種類一日千里，那么膜的再使用能夠節約研究時間，推進研究進程，在不影響實驗準確的前提下，那么在使用的意義是很明顯的。現在這里我來講一下抗體洗脫液--stripping buffer。

    在介紹抗體洗脫液的原理前，先來看看抗原抗體結合的一些環境條件吧，通常我們的抗體稀釋液選擇是：TBST和PBST，這里的兩種抗體稀釋液的pH值均在7.4-7.8之間。那么問題就來了，為什么抗體稀釋液的pH值是這樣的呢？

    抗原抗體的結合反應：抗原與抗體能夠特異性結合是基于抗原決定簇(表位)與抗體超變區的溝槽分子表面的結構互性與親合性而結合的。

一、抗原抗體的結合力

抗原抗體間結合為非共價鍵結合：靜電引力、范登華引力、氫鍵結合力、疏水作用力

二、抗原抗體的親合性和親合力

親合性是指抗體分子上一個抗原結合點與對應的抗原表位之間相互適 應而存在的引力，由于抗原抗體的結合 反應是可逆的，若抗體的親合力高，與抗原分子結合牢固，不易解離；反 之即容易解離。

三、親水膠體轉化為疏水膠體

大多數抗原為蛋白質，抗體是球蛋白，它們溶解在水中皆為膠 體溶液，不會發生自然沉淀。當抗原抗體結合后，蛋白質由親水膠體轉化為疏水膠體。再加入電解質，如 NaCl，則進一步使疏水膠體物相互靠攏，形成可見的抗原抗體復合物。

那么我們破壞這些中作用力，就能是抗原抗體復合物解離。

    抗體洗脫液的原理就是利用強酸環境下，破壞結合力等因素，使得抗原抗體復合物變成抗原抗體單體。說道這里，我想大家了解了stripping buffer的作用原理了吧！