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          50%的科學家,因為這個原因實驗結果無法重現?

          發布日期: 2019-07-31
          瀏覽人氣: 1971

           

           

          實驗失敗時,害怕的是什么?

          對,就是對失敗的原因一無所知。

          我們會懷疑儀器試劑、懷疑實驗方法、

          懷疑操作流程,甚懷疑人生。

          常常有實驗員哭訴,

          為什么免疫學實驗又雙叒叕失敗了?

          殊不知,

          問題很有可能出現在選抗體上。

           

           

          我們都知道,WB、IHC、ELISA等常規實驗技術都離不開抗體,抗體的質量優劣關乎實驗的成敗,一旦抗體造假,不僅浪費了科研者的寶貴時間、金錢及實驗材料,甚有可能讓研究者誤入歧途(得出一系列錯誤的實驗結果或重復性差),而這無形中會損害他們所作出的努力以及學術聲譽。

           

          抗體造假,是整個試劑行業嚴重的現象。據機構顯示,在上千份抗體產品質量投訴中,假貨問題占了43%;在500份問卷調查中,有43%的人曾使用假冒偽劣試劑耗材;703位生物學家,50%無法重復自己的實驗結果。

          抗體造假手段可謂是五花八門,比如直接造假(根本不知道瓶子里裝的是什么)、用分子量接近的廉價抗體冒充昂貴的稀有抗體(很難檢測出來)等,常見的就是稀釋抗體,把一份試劑稀釋成5份,導致效價下降,有時有用,有時沒用。

           

          關于抗體質量穩定性和可靠性問題,早在08年,瑞士科研項目HPA就曾對29家供應商的9000多種抗體(包括單抗和多抗)進行WB和IHC驗證,來檢測這些抗體是否有效。其結果竟令人大跌眼鏡:49%的抗體*無效,且僅有7%的抗體被認為是*有效且擁有前后實驗一致性。據估計,每年因購買質量差的抗體導致的損失達到8億美金。而抗體之所以這么不穩定并難以產生有效性,究其原因,一方面是因為抗體市場龐雜帶來了抗體質量的殘次不齊,另一方面則是因為抗體本身就具有抗原交叉反應性、多樣性和實驗差異性,進而也會影響抗體的特異性和親和性。即使是未經污染的抗體有時也會給實驗帶來困難,不同批次的抗體可能存在自然差異,它們可能靶向研究者預期之外的蛋白質。所以陰性結果可能是多種原因導致的,這種不確定性使得假冒試劑很難被發現。

           

          現階段我們身處于抗體亂象泥潭之中,如何獲得一支真正有效的抗體?如何選擇和購買抗體是關鍵,想要買到性價比高的抗體,有沒有隱藏的規則,如何煉就自己的火眼金睛?請繼續往下看。

           

           

          1. 抗體基本的信息

           

          1. 要購買的抗體名稱(基因名,蛋白名都可以,比如AKT);

          2. 要用于什么實驗(可用于多種實驗,比如WB/IHC/FCM/IF);

          3. 樣本是什么種屬(可用于多種種屬,比如human/mouse/rat/rabbit);

          4. 如果是磷酸化抗體的:對磷酸化位點是否有要求,一般提供要檢測的磷酸化位點,如果使用者對磷酸化位點沒有要求的,就由查到的品牌廠家來推薦,廠家會推薦他們賣得比較多而且效果比較好的磷酸化抗體。

           

           

           

          2. 單克隆和多克隆的選擇

           

          有人認為單抗比多抗好,其實這并不是一個嚴謹的觀點,只能說在可能性上單抗的特異性更好一些,而多抗的親和力會優于單抗,并且特異性并不一定就遜于單抗,主要看抗原的設計水平。不建議糾結于單抗好還是多抗好。在選擇上一般建議實驗種屬和抗體種屬親緣性越遠越好,不宜同源。

           

          3. 抗體選擇的隱藏規則  

           

          1. 質量好,價格便宜(性價比高,索萊寶產品價格是國外的1/3左右,而且有小包裝規格);

          2. 到貨速度快(國外公司一般3-4周,索萊寶公司大多有現貨,多1周);

          3. 售前售后有保障(國外抗體咨詢投訴周期一般都非常長,索萊寶公司一般1周就可以解決,還可以免費索取一些抗體小樣,抗體免費試用活動正在火熱進行);

          4. 抗體的運用可以多種實驗,反應物種可以多樣(實驗必須是同一類實驗,別人做IHC的抗體用做WB可能是沒有結果的);

          5. 廠家發布出的實驗效果圖(完善的驗證數據及詳細的信息標準是抗體選擇的必要條件),比如是否明確標注其可以用于WB、IHC等實驗、是否有足夠的數據支持證明該抗體適用于某一組織或者樣本(樣本的處理過程和要求)、是否有明確的抗體建議稀釋濃度、該抗體的識別位點是連續的氨基酸序列的一級結構還是非連續性氨基酸的三維結構位點,天然的還是變性的……這些信息和數據的真實性及完整性是保證WB、IHC等實驗順利進行的關鍵;

          6. 別找純代工的品牌多花冤枉錢,制造和生產型的供應商對自己產品更加了解,出現問題容易找到原因;

          7. 一定要從正規渠道購買(生產商和制造商或正規的授權經銷商);

          8. 有效的內參抗體是實驗結果真實可靠的重要憑證,尤其在WB實驗中,常會借助內參來校正蛋白定量、上樣過程中存在的實驗誤差。值得注意的是,不同的內參抗體只適用于一定范圍的樣本和組織,我們需要查閱參考文獻,并根據樣本和組織的差別選擇合適的內參抗體,以確保實驗的準確性,索萊寶擁有完備的標簽內參抗體庫

          9. 常言道,實踐是檢驗真理的標準,對于文獻或網站中現成的已經驗證過的親和力高、特異性強的抗體,我們只需將拿來主義進行到底即可。此時仍需要特別注意的是文章的可靠性;即便如此,在相應抗體購買回來后,建議做些簡單預實驗來保證抗體的特異性。如果只有陽性有條帶,陰性沒有條帶,恭喜你,你確實買到了一支靠譜的好抗體,可以放心大膽的開始正式實驗了。

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          4. 進口or國產品牌的選擇

           

          常見的國產品牌也有很多,如國產索萊寶品牌這幾年猶如異軍突起,近年來也被國內外學術界認可。無論是在價格上(折后價格一千多元)、在質量上、包裝上(含有小包裝)、到貨速度上(2-3天)、售前咨詢、售后支持以及暫時還未出現假貨等方面,都能完勝其他進口品牌,不足之處:非常用產品在文獻支持方面有些不足。為此我們特設專項獎學金計劃,期望大家踴躍參與,無論是發文章,曬圖片和寫評論我們都有獎品或獎金給辛苦實驗的科研工作者,旨在建立產品應用數據庫,為抗體的選擇和應用提供參考價值。

           

           

          5. 抗體的未來之星

          不要小看一小瓶試劑,這是一個國家綜合實力的體現。中國的試劑想要*打入市場,還需要很長時間。事實上,抗體質量問題從來不是一個技術問題而是一個商業利益和科研需求之間產生的矛盾問題,大量抗體產品本身就是在國內本土生產,中國*具有能力生產高質量抗體,與其繞遠,不如加大鼓勵民族本土品牌崛起。索萊寶與您一起披荊斬棘,開疆拓土,打造中國人自己的科研產品小*,索萊寶相信在我們的共同努力下,一定可以讓我們自己的科研產品民族品牌流光溢彩。

          目前,索萊寶專注于自主品牌的創立,建立的自主研發平臺,同時聘請業內資深團隊原料的把關產品的研發生產和質控等各個環節嚴格控制,保證產品的質量。同時我們順應抗體驗證工作組發布的驗證抗體特異性五大策略的標準和要求,逐步建立抗體驗證平臺,對抗體進行驗證,力求為科研工作者提供抗體選用的參考信息,進而提升我們產品的市場競爭力,增加國產科研產品的*。

           

          此外,科研工作者們可共同努力,提高對假貨的意識。共享避免假貨的建議,甚可以公布銷售低質量產品公司的黑名單。只有用戶積極參與到反饋數據分享,建立科研行業的“大眾點評”,才能夠以第三方監督的機制促進行業改革。請不要盲目相信進口,也不要對國產嗤之以鼻,事實上,選抗體就像選對象,適合的才是好的。

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