Hoechst 33342/PI雙染試劑盒

品牌：Solarbio | 貨號：CA1120

產品說明：

Solarbio生產的細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細胞凋亡與細胞壞死檢測方法。    本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細胞發(fā)生凋亡時，染色質會固縮。Hoechst33342可以穿透細胞膜，染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜，對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞，其細胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光，壞死細胞為強紅色熒光＋強藍色熒光。參考下圖，左圖為誘導凋亡前的正常細胞，右圖為誘導凋亡后的細胞。

染色快速方便，兩種染料的染色僅需20-30分鐘，一步染色即可完成。    使用方便，使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。    本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數(shù)量可以為1×105-1×106。

產品內容：

                                        100T           500T

細胞染色緩沖液                100ml             500ml

Hoechst染色液                 0.5ml             2.5ml

PI染色液                           0.5ml              2.5ml

說明書                               1 份                1 份

使用說明：

1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內，離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1ml細胞染色緩沖液重懸。

2. 加入5微升Hoechst染色液。

3. 加入5微升PI染色液。

4. 混勻，冰浴或4℃孵育20-30分鐘。

5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測，檢測前離心沉淀細胞，用PBS洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測，可以不收集細胞，直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項：

需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。

Hoechst 33342對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性，請注意適當防護。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。